1%琼脂糖凝胶电泳_1%琼脂糖凝胶电泳时间需要多久

1%琼脂糖电泳后,为什么看不到我的目的条带?？

条带短,能结合的EB（或其他染料）就少,所以相对长片段亮度就很弱,一般小于500就很难看清.

1%琼脂糖凝胶电泳_1%琼脂糖凝胶电泳时间需要多久

1%琼脂糖凝胶电泳_1%琼脂糖凝胶电泳时间需要多久

1%琼脂糖凝胶电泳_1%琼脂糖凝胶电泳时间需要多久

解决方案,基本上楼上的都提到了：

1.提高琼脂糖凝胶浓度到2%-3%

2.跑个单酶切对照,有异就表示有连接进去.不过如果是要回收目的片段,建议还是用载体上的序列PCR扩增,而且回收小于400bp的DNA不太容易呵,5,调高凝胶浓度。,2,用2%的agarose gel ,跑梯度 5 10 15ul

建议PCR之后再跑，可能酶切 的量太低

琼脂糖分辨,0,你加marker了吗？看看marker不就知道了。说不定是已经跑出去了。。。,0,1%琼脂糖电泳后,为什么看不到我的目的条带?

我的目的条带是177bp,从质粒中双酶切后跑电泳,几乎看不到我的目的条带,是不是因为目的条带比较小,跑的比较前面,本身就容易变得模糊,亮度减弱的?双酶切是20ul体系,点样时用了8ul.酶切后电泳,大的条带比较清晰,我的目的条带177bp的几乎看不见,不知是什么原因,

当然加了MARKER了。还没跑出去呢~不过谢谢回答

1%琼脂糖凝胶电泳中所需的溶液,以及配制

电泳缓冲液一般是1×TAE或者0.5×TBETAE一般配制成50×的储存液组分浓度2M Tris-醋酸,100mM EDTA 配制方法： 1.称量Tris 242g,Na2EDTA·2H2O 37.2g于1L烧杯中；2.向烧杯中加入约800ml去离子水,充分搅拌均匀；3.加入5...

请教 如何将琼脂糖凝胶电泳跑漂亮

一般PCR或RT-PCR的产物电泳时应该用＞1%的琼脂糖凝胶进行电泳，

事实上，很多情况下胶跑得不够漂亮跟一些微不足道的细节有关，有时候做胶前如果梳子没洗干净，胶的孔就不够整齐；

还有点样时，不要让枪头戳到孔的边沿，尤其是前沿，如果戳缺一点，跑出来的胶就是弯曲的。

不要用这么长的胶跑，等点到面的样时，前面的样都有点扩散了，跑的不是很漂亮。

如何做1％的琼脂糖凝胶电泳？

1、制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液。

2、胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶玻璃板.取透明胶带将玻璃板与内槽两端边缘封好,形成模子.将内槽置于水平位置,并在固定位置放好梳子.将冷却到65℃左右的琼脂糖凝胶液混匀小心地倒入内槽玻璃板上,使胶液缓慢展开,直到整个玻璃板表面形成均匀胶层。

3、室温下静置直至凝胶完全凝固,垂直轻拔梳子,取下胶带,将凝胶及内槽放入电泳槽中。添加1×TAE电泳缓冲液至没过胶板为止。

扩展资料：

储藏温度:常温

商品名很多，常见的有，Sepharose（瑞典，pharmacia ），Bio-Gel-A（美国Bio-Rad）等。琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构，网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下，它的结构是稳定的，可以在许多条件下使用（如水，pH4-9范围内的盐溶液）。

琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化，也不能高压消毒，可用化学灭菌活处理。

琼脂糖 Agarose，缩写为AG，是琼脂中不带电荷的中性组成成份，也译为琼胶素或琼胶糖。琼胶糖化学结构由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基单位构成.

把琼脂糖，即几乎不含硫酸根的主要成分为多糖的琼脂，溶于热水，冷却制成的凝胶。制成的小颗粒用于凝胶过滤。适于用sephadex不能分级分离的大分子的凝胶过滤，若使用5%以下浓度的凝胶，也能够分级分离细胞颗粒、等。

利用其吸附性小的特点，有时用它代替琼脂、以作为免疫电泳或凝胶内沉降反应的支持物。

参考资料：

凝胶电泳加入多少琼脂？

常用 1% 的琼脂糖作为电泳支持物。电泳缓冲液的 pH 在 6～9 之间，离子强度 0.02～0.05 为最适。常用 1% 的琼脂糖作为电泳支持物。琼脂糖凝胶约可区分相 100 bp 的 DNA 片段，其分辨率虽比聚凝胶低，但它制备容易，分离范围广。

普通琼脂糖凝胶分离 DNA 的范围为 0.2～20 kb，利用脉冲电泳，可分离高达 107 bp 的 DNA 片段。

如何选用琼脂糖凝胶电泳时的marker

如果是marker比较简单吧,就是看marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker.

另外就是,如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓度较大,就不能用分子量太大的marker,例如,只检测200bp的条带,那么用分子量到1000,或者500的marker就比较合适.

如果分子量很大,例如在几k,就可能会选择向lamda HindIII这样到23K的marker.否则凝胶浓度不合适,marker条带分不开,影响对你目标分子分子量的判断.