流式细胞仪检测_流式细胞仪检测细胞周期的流式图

流式细胞仪检测淋巴细胞因子时抗体怎么加

携带荧光染料的caspase3的底物，进入细胞后，如果有激活的caspase3, 荧光染料被释放，DNA被染，流式检测阳性与传统方法相比，用流式细胞仪来检测HLA-B27的表达，灵敏度可达，特异性达97.4%，阴性结果强直性脊柱炎的排除率为99.9%;结果稳定，样本之间，不同仪器之间，不同实验室之间可重复性高。测定值高于参比值者为阳性，反之为阴性。细胞就可以了。

种是检测细胞内的，需要固定和通透细胞膜，然后加抗体染色，在洗去未结合的抗体

流式细胞仪检测_流式细胞仪检测细胞周期的流式图

流式细胞仪检测_流式细胞仪检测细胞周期的流式图

请教怎么运用流式细胞仪检测细胞内钙离子

待测样品(如细胞、微球、或细菌等)被制成单细胞悬液，在一定压力下被鞘液包裹着形成单列的细胞进入流动室，并与激光束相交。细胞被激光激发后有几种设可以解释HLA-B27与脊柱关节病的关系:产生散射光和荧光，经光电转换器处理后变为电信号，在电脑上以数字信号的形式展现出来。

求助，流式细胞仪检测多抗原前准备

2. 然后细胞通过检测窗口。有激光束照射。一般细胞都经过荧光染色，被激光照射后，会有不同波长的激发光产生。机器设有检测器来探测激发光的强弱

事先要尽量搞清楚多个抗原在同一细胞上的相对表达量，例如哪个是表达最强的，哪个是表达最弱的，哪些是中等的。

查找市场上有的针对所要检测抗原的荧光标记抗体。是把荧光素的强度和抗原表达量配对为反向。比如要检测三个抗原A, B，C, A的表达量，就尽量选标记了荧光强度最弱荧光素的抗体，比如Pacific Blue。而表达量的抗原，就选荧光强度的，比如APC。

选好抗体后，每个抗体都要测定工作浓度。同样浓度的细胞，用不同量的抗体染色后，上机检测，计算染色指数（stain index），SI的那个浓度，就是上机前，用细胞滤网过滤掉大块未消化的杂质工作浓度。

4. 每个抗体的工作浓度都确立后，染样本的时候，也要使用同样的细胞浓度来染。

5. 除了要检测的样本外，另外还要准备无染色样本，每个抗体单独染色的阳性样本，作为调节荧光补偿之用。

完成了这些后，就可以去检测你的样本了。

流式细胞仪的原理是什么

参考资料来源：百度百 HLA-B27检测

最近一直在了解流式细胞术和流式分选的知识，看到这个问题想回答一下：

流式细胞仪是以流式细胞术为基础，快速的对单个细胞的理化性质进行定量分析和分选。分析流程为：制备单细胞悬液，用特异性荧光染料标记的抗体进行染色，经染色后的待测细胞在一定气体压力下被压入流动室，在鞘液的包裹下细胞呈单行排列，依次通过检测区域，在激光束的照射下细胞会产生散射光和激发荧光。这两种信号会同时被光电倍增管( PMT) 接收。接收后可转换为电信号，通过模/数转换器，将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号，进行分析。

如上所述，流式细胞仪是由液流系统、光路系统以及检测分析系统三部分组成，部分仪器还具有分选功能，能对粒子进行充电和偏转从而实现细胞分选。 液流系统：通过产生压力使含有目的细胞的样本快速进入仪器，在封闭的样品管中利用样品和鞘液之间的压力是样本聚集扩展资料：到光学分析系统；

光路系统：由不同的激光器发射出的激光照射到细胞表面产生光信号，而后经过不同的光路系统被接收。在流式照射室的分析点，激光照射到细胞表面发生散射和折射，并发射出散射光包括前向散射光（FSC）和侧向散射光（SSC）,同时细胞表面的荧光素被激发发射出荧光。前向散射光和侧向散射光检测器收集散射光转变为电信号；荧光则被聚光器收集，不同颜色的荧光被双色反光镜转向不同的光电倍增检测器，将荧光信号也转变成电信号。FSC和SSC是流式分析中两个非常基本的参数。FSC的值能代表细胞的大小，细胞的体积越大则FSC就越大。SSC则代表细胞的颗粒度，细胞内细胞器和颗粒度越大则SSC越大。

检测分析系统：荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原强度或细胞内物质的浓度，光信号转换为可被计算机识别的电信号。计算机把所测量的各种信号进行处理分析。

流式细胞分选是在流式细胞术的基础上进行的。在流动室的喷口上方配有一个超高频的压电晶体，产生的振动使喷出的液流形成均匀的液滴，待测细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷（对标有荧光素的细胞液滴带以负电荷；未标记荧光素的细胞液滴带以正电荷；而不含有细胞的液滴则不被带电荷），当液滴流经偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，不带电荷的液滴落入废液容器，从而实现细胞的分离。

次回答希望能帮到你，如有理解不当的地方，欢迎指正！

我简单说一下：

3. 根据激发光的强弱，来判断细胞和染色物质的结合情况，从而得到要检测的结果（比如抗原量，DNA量，等等）

我简单说一下：

3. 根据激发光的强弱，来判断细胞和染色物质的结合情况，从而得到要检测的结果（比如抗原量，DNA量，等等）

纳米流式检测仪可实现单个纳米颗粒（7-1000 nm）的粒径及其分布、颗粒浓度、以及生物化学性状的高灵敏、高选择性、高通量检测，将成为生命科学、纳米科学和纳米技术研究的一个强有力的表征工具。纳米流式检测仪是基于鞘流单分子荧光检测技术开发的一种先进的单颗粒、多参数、高通量的纳米颗粒定量表征平台，对于单个低折射率纳米颗粒的散射检测灵敏度达到前所未有的24 nm，具有灵敏度高、速度快、物理和生化性状同时检测、以及悬液检测等优势。

我简单说一下：x0dx0a1.首先，机器吸取细胞混悬液，射入由鞘液（一般都是缓冲液）。由于鞘液的流速大，所以细胞混悬液通过轴流的形式在，一般是单个细胞排队的形式。x0dx0ax0dx0a2.然后细胞通过检测窗口。有激光束照射。一般细胞都经过荧光染色，被激光照射后，会有不同波长的激发光产生。机器设有检测器来探测激发光的强弱x0dx0ax0dx0a3.根据激发光的强弱，来判断细胞和染色物质的结合情况，从而得到要检测的结果（比如抗原量，DNA量，等等）

如何用流式细胞仪检测转染细胞的效率？

优点：检测灵敏度：24 nm低折射率纳米步是在FSC， SSC散点图上根据细胞大小gate出淋巴细胞群。然后在gate出单细胞群。检测CD4和CD8，应该还要同时染色CD3. 先选中CD3阳性的细胞（T细胞），然后把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示，可以分为四个象限。分别代表CD4阳性，CD8阳性，双阳性，和无染色的。正常情况下，是不应该有双阳性和未染色的，也就是说你的细胞应该只显示在4个象限的其中的两个。其他的两个最多只是一些背景的杂信号。代表T细胞的两个亚群。颗粒的散射检测，单个藻红蛋白的荧光检测。纳米颗粒（<100 nm）多参数定量表征流式设备。检测范围覆盖外泌体完整粒径（30-200 nm）。

阴性对照用转染无GFP载体的细胞，因为转染可能会改变细胞的自发荧光本地

不要固定，GFP固定后荧光强度会下降。

如何用流式细胞仪测CD4，CD8并分析

流式1. 首先，机器吸取细胞混悬液，射入由鞘液（一般都是缓冲液）。由于鞘液的流速大，所以细胞混悬液通过轴流的形式在，一般是单个细胞排队的形式。检测细胞因子，有两种做法：

求助：流式细胞仪检测血细胞，全血的贮存方法

确保阴性对照和实验用于流式检测的全血需要用EDTA抗凝（抽血时使用BD的紫色盖抽血管），抽血后不要冷藏或者冷冻。室温下保存24小时内完成检测。如果血样超过72小时，就不能再用于流式检测了。细胞的浓度相同，具体多少倒是无所谓，不要太稀释就好

流式细胞仪可以检测caspase3吗

现已证明，HLA-B27M1与M2两种抗原决定簇和致关节因素绍克雷白菌、志贺杆菌和那尔森菌能发生交叉反应。反应低下者似乎多表现为AS，反应增强者则发展为反应性关节炎或Reiter综合征。

目前有两种方法用在流式检测另外一种是荧光小珠为基础的，检测溶液内细胞因子。可以同时检测一个系列。小珠按照荧光种类和强弱的不同，表面事先固定好了相应的抗体。和样本混合后，在加入另外一种荧光标记的抗体。结果看起来就是下面这个图：： 特异性的针对激活的caspase3的荧光抗体

我用流式细胞仪检测了CD4，CD8，图怎么看，各象限表示什么

这是利用一些对钙离子浓度比较敏感的荧光染料来实现的。比如Fluo-3，用波长为488nm的激光激发，所发出的荧光强度和④、HLA-B27增强中性白细胞活动性。钙离子浓度呈正相关，可以用流式细胞仪来检测比较对个样本之间的别

你的图呢，先贴一下图吧，不然只能猜了。

检测CD4和CD8，应该还要同时染色CD3. 先选中CD3阳性的细胞（T细胞），然后把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示，可以分为四个象限。分别代表CD4阳性，CD8阳性，双阳性，和无染色的。正常情况下，是不应该有双阳性和未染色的，也就是说你的细胞应该只显示在4个象限的其中的两个。其他的两个最多只是一些背景的杂信号。代表T细胞的两个亚群。

HLA-B27检测需空腹吗？

同时检测多个抗原，就需要多种抗体。我来简单说一意事项：

需要。

籍助单克隆抗体、细胞毒性淋巴细胞、免疫电泳及段长度多形态法(restrictionfragmentlengthpolymorphi)，目前已确定HLA-B27约有7种或8种亚型。

HLA_B27是检查是否有强直性脊柱炎，是一种基因检查，虽与饮食关系不大，但是为了结果更准确，空腹抽血检查。

需尽早去风湿免疫科或专业医院进行系统化的力争早期诊断、早期治疗。针对患者身体状况、病情发展早中晚期程度、目前主要症状表现、耐性、既往治疗、患者经济承受能力”等多方面提出分期分型施治。

HLA-B27与遗传的关系

遗传因素在AS的发病中具有重要作用。据流行病学调查，AS病人HLA-B27阳性率高达90%~96%，而强直性脊柱炎普通人群HLA-B27阳性率仅4%~9%;HLA-B27阳性者AS发病率约为10%~20%，而普通人群发病为1‰~2‰，相约100倍。

但是应当看到，一方面HLA-B27阳性者并不全部都发生脊柱关节病，另一方面约有5%~20%脊柱关节病病人检测HLA-B27呈阴性，提示除遗传因素外，还有其他因素影响AS的发病，因此HLA-B27在AS表达中是一个重要的遗传因素，但并不是影响本病的因素。

①、HLA-B27充当一种感染因子的受体部位;

②、HLA-B27是免疫应答基因的标志物，决定对环境激发因素的易感性;

③、HLA-B27可与外来抗原交叉反应，从而诱导产生对外来抗原的耐受性;

多数HLA-B27分子还有M2抗原决定簇。HLA-B27M2阴性分子似乎比其他HLA-B27亚型与AS有更强的联系，尤其是人，而HLA-B27M2阳性亚型可能对Reiter综合征的易感性增强。