什么叫pcr检测 什么是pcr检测方法

2025-01-11 15:34 - 立有生活网

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什么叫pcr检测 什么是pcr检测方法


1、5琼脂糖电泳一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。

2、通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。

3、实时检测PCR扩增,在扩增的指数期对起始模板进行定量,在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增强。

4、我们实验室使用的BIOGHSC Super Probe Kit PCR实验检测DNA,测得的循环数在28左右,整个PCR过程有4个阶段,基线期---指数增长期---线性增长期---平台期,指数增长期内,PCR有高度重复性,一般的检测指标是看线性图谱的扩增曲线的起跳值(CT值)。

5、Real-timePCR是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。

6、由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。

7、技术原理在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,求得Ct值,同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照,即可得出待测标本目的基因的拷贝数。

8、将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中。

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